Taula de continguts:
- Pas 1: Visió general de la microscòpia de fluorescència
- Pas 2: Modelatge de microscopis amb òptica de raigs
Vídeo: Microscopis de fluorescència i Brightfield de baix cost: 9 passos (amb imatges)
2024 Autora: John Day | [email protected]. Última modificació: 2024-01-30 08:13
Projectes Fusion 360 »
La microscòpia de fluorescència és una modalitat d'imatge que s'utilitza per visualitzar estructures específiques en mostres físiques i biològiques. Els objectes d'interès de la mostra (per exemple, neurones, vasos sanguinis, mitocondris, etc.) es visualitzen perquè els compostos fluorescents només s'adhereixen a aquestes estructures específiques. Algunes de les imatges de microscòpia més boniques es recullen amb microscopis de fluorescència; mireu aquestes imatges presentades a la pàgina web de Nikon MicroscopyU per veure'n alguns exemples. La microscòpia de fluorescència és útil per a molts estudis de biologia que se centren en una estructura o tipus de cèl·lula específics. Per exemple, molts estudis de recerca sobre neurones del cervell depenen de l’ús de modalitats de microscòpia de fluorescència que específicament representen les neurones.
En aquest instructiu, repassaré els principis bàsics de la microscòpia de fluorescència i com construir tres microscopis de fluorescència de baix cost. Aquests sistemes solen costar milers de dòlars, però hi ha hagut esforços recents per fer-los més fàcilment disponibles. Els dissenys que presento aquí utilitzen un telèfon intel·ligent, un DSLR i un microscopi USB. Tots aquests dissenys també funcionen com a microscopis de camp brillant. Comencem!
Pas 1: Visió general de la microscòpia de fluorescència
Per entendre la idea bàsica de la microscòpia de fluorescència, imagineu un bosc espès a la nit ple d’arbres, animals, arbustos i tot el que viu en un bosc. Si llanceu una llanterna al bosc, veureu totes aquestes estructures i pot ser difícil visualitzar un animal o planta específic. Diguem que només us interessava veure arbusts de nabius al bosc. Per aconseguir-ho, heu d’entrenar les luciérnules perquè només es vegin atreïdes pels arbustos de nabius, de manera que només s’encenguin els arbustos de nabius quan mireu el bosc. Es podria dir que heu etiquetat els arbustos de nabius amb les luciérnules per poder visualitzar només les estructures de nabius al bosc.
En aquest anàleg, el bosc representa tota la mostra, els arbustos de nabius representen l’estructura que voleu visualitzar (per exemple, una cèl·lula específica o un orgànul subcel·lular) i les lluernes són el compost fluorescent. El cas en què es llueix la llanterna sola sense les llucernes és anàleg a la microscòpia de camp brillant.
El següent pas és entendre la funció bàsica dels compostos fluorescents (també anomenats fluoròfors). Els fluoròfors són objectes realment petits (a escala de nanòmetres) dissenyats per fixar-se a estructures específiques de la mostra. Absorbeixen la llum en un rang estret de longituds d’ona i reemeten una altra longitud d’ona de llum. Per exemple, un fluoròfor pot absorbir la llum blava (és a dir, el fluoròfor és excitat per la llum blava) i tornar a emetre llum verda. Normalment, això es resumeix en un espectre d’excitació i emissió (imatge superior). Aquests gràfics mostren la longitud d'ona de la llum que absorbeix el fluoròfor i la longitud d'ona de la llum que emet el fluoròfor.
El disseny del microscopi és molt similar a un microscopi normal de camp brillant amb dues diferències importants. En primer lloc, la llum per il·luminar la mostra ha de ser la longitud d'ona que exciti el fluoròfor (per a l'exemple anterior, la llum era blava). En segon lloc, el microscopi només ha de recollir la llum d’emissió (la llum verda), tot bloquejant el blau. Això es deu al fet que la llum blava va a tot arreu, però la llum verda només prové de les estructures específiques de la mostra. Per bloquejar la llum blava, el microscopi sol tenir una cosa anomenada filtre de pas llarg que permet passar la llum verda sense llum blava. Cada filtre de pas llarg té una longitud d'ona de tall. Si la llum té una longitud d’ona més gran que la de tall, pot passar pel filtre. D'aquí el nom, "pas llarg". Les longituds d'ona més curtes estan bloquejades.
A continuació, es detallen diverses panoràmiques de la microscòpia de fluorescència:
bitesizebio.com/33529/fluorescence-microsc…
www.microscopyu.com/techniques/fluorescenc…
www.youtube.com/watch?v=PCJ13LjncMc
Pas 2: Modelatge de microscopis amb òptica de raigs
Accèssit al Concurs d’ Optptica
Recomanat:
El 'Sup: un ratolí per a persones amb tetraplegia: de baix cost i de codi obert: 12 passos (amb imatges)
The Sup: un ratolí per a persones amb tetraplegia: de baix cost i de codi obert: a la primavera del 2017, la família del meu millor amic em va preguntar si volia volar a Denver i ajudar-los amb un projecte. Tenen un amic, Allen, que té quadriplegia com a conseqüència d’un accident de bicicleta de muntanya. Fèlix (el meu amic) i jo vam fer una investigació ràpida
PCB de llum LED anell DIY per a microscopis !: 6 passos (amb imatges)
PCB de llum LED d'anells de bricolatge per a microscopis !: He tornat i aquesta vegada he posat a prova les meves habilitats de disseny de taulers. En aquest instructiu us mostro com vaig dissenyar la meva pròpia llum d'anell de microscopi i alguns reptes que vaig trobar al llarg del camí. Vaig comprar un segon microscopi per a ús electrònic i
Robot de dibuix compatible amb Arduino de baix cost: 15 passos (amb imatges)
Robot de dibuix compatible amb Arduino de baix cost: Nota: Tinc una nova versió d’aquest robot que utilitza una placa de circuit imprès, és més fàcil de construir i té detecció d’obstacles IR. Mireu-ho a http://bit.ly/OSTurtle. Vaig dissenyar aquest projecte per a un taller de 10 hores per a ChickTech.org que té com a objectiu
Mini suport de micròfon d'aspecte professional a baix cost i amb presses: 7 passos (amb imatges)
Mini suport de micròfon d'aspecte professional a baix preu i de pressa: així que em vaig endur un escabetx. Vaig acceptar gravar una sessió de D & D el dissabte, avui és dimecres. Dues setmanes abans vaig agafar una interfície d’àudio (comprovar), la setmana següent vaig aconseguir una oferta molt bona en alguns micròfons (comprovar), el cap de setmana passat
UDuino: Tauler de desenvolupament compatible amb Arduino de molt baix cost: 7 passos (amb imatges)
UDuino: Taula de desenvolupament compatible amb Arduino de molt baix cost: les plaques Arduino són ideals per prototipar. No obstant això, són bastant cars quan teniu diversos projectes simultanis o necessiteu moltes plaques de control per a un projecte més gran. Hi ha algunes alternatives fantàstiques i econòmiques (Boarduino, Freeduino), però